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化学发光法是检测什么的?_化学发光法原理

栏目:数码科技

作者:B姐

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时间:2024-02-25 09:59:31

化学发光法是检测待测物含量的。

它主要是依据化学检测体系中待测物浓度与体系的化学发光强度在一定条件下呈线性定量关系的原理,利用仪器对体系化学发光强度的检测,而确定待测物含量的一种痕量分析方法。化学发光法在痕量金属离子、各类无机化合物、有机化合物分析及生物领域都有广泛的应用。

化学发光应用

化学发光Western杂交检测,是同位素检测的一种高度灵敏的替代方法。酶标记抗体取代了放射性标记抗体,当它作用于底物时,可产生光信号。多数特异抗原检测方法以辣根过氧化物酶(HRP))碱性磷酸酶(AP)二级抗体耦联物为基础。

信号可通过感光胶片或专yong的成像设备来采集。化学发光底物用于印迹技术已有十几年的历史,目前大部分实验室做转印时都会采用化学发光技术进行检测。

随着冷CCD化学发光检测技术的发展,现在越来越多的实验室都开始采用冷CCD的凝胶成像系统进行化学发光的检测,胶片成像虽然比自然发光法灵敏度更高,但也有很多缺点:耗时,需要暗房,显影剂和胶片,胶片较贵且为需持续购买的消耗品。

同时由于胶片的线性范围较窄,因此用胶片上的条带(特别是表达量较低的条带)进行定量几乎不可能。冷CCD技术与X胶片相比具有瞬时影像处理、高灵敏度和高分辨率、动力范围广等优点。

以上内容参考:百度百科-化学发光法

关于化学发光检测法

荧光、磷光、化学发光的原理有2点不同,相关介绍具体如下:

一、三者的原理不同:

1、荧光的原理:光照射到某些原子时,光的能量使原子核周围的一些电子由原来的轨道跃迁到了能量更高的轨道,即从基态跃迁到第一激发单线态或第二激发单线态等。第一激发单线态或第二激发单线态等是不稳定的,所以会恢复基态,当电子由第一激发单线态恢复到基态时,能量会以光的形式释放,所以产生荧光。

2、磷光的原理:当某种常温物质经某种波长的入射光(通常是紫外线或X射线)照射,吸收光能后进入激发态(通常具有和基态不同的自旋多重度),然后缓慢地退激发并发出比入射光的波长长的出射光。

3、化学发光的原理:如A、B两种物质发生化学反应生成C物质,反应释放的能量被C物质的分子吸收并跃迁至激发态C*,处于激发的C*再回到基态的过程中产生光辐射。这里C*是发光体,此过程中由于C直接参与反应,故称直接化学发光。

二、三者的实质不同:

1、荧光的实质:在日常生活中,人们通常广义地把各种微弱的光亮都称为荧光,而不去仔细追究和区分其发光原理。

2、磷光的实质:一种缓慢发光的光致冷发光现象。

3、化学发光的实质:物质在进行化学反应过程中伴随的一种光辐射现象,可以分为直接发光和间接发光。

扩展资料:

化学发光的其他介绍:

一个化学反应要产生化学发光现象, 必须满足以下条件:

1、该反应必须提供足够的激发能,并由某一步骤单独提供,因为前一步反应释放的能量将因振动弛豫消失在溶液中而不能发光;

2、要有有利的反应过程,使化学反应的能量至少能被一种物质所接受并生成激发态;

3、是激发态分子必须具有一定的化学发光量子效率释放出光子,或者能够转移它的能量给另一个分子使之进入激发态并释放出光子。

百度百科-化学发光

百度百科-磷光

百度百科-荧光(发光现象)

鲁米诺发光原理

化学发光检测法有很多,不知你说的是不是焰色反应,如果是焰色反应,则是由于金属原子内部电子能级跃迁导致的,不同金属会发出不同颜色(波长)的光。这时一般只能作为定性检测,不能作为定量检测。

如果指的是原子发射光谱,其发光原理也是原子中最外层电子受到激发(可以是光致也可以是热致等等),由基态转化为激发态,然后跃迁回基态以光的形式辐射能量。这时可以作为定量分析(可定量必可以定性),这时可以看发射光谱谱图曲线的高度,一般有几种方法来测量,像外标法,内标法,标准曲线法等等,如果想知道更详细的东西可以参考仪器分析的有关内容。

乳胶反应和荧光反应的区别

鲁米诺发光的原理:

一是次氯酸钠氧化鲁米诺使其发光;二是过氧化氢与次氯酸钠反应生成氧气氧化鲁米诺使其发光:首先是次氯酸钠和过氧化氢反应的方程式:NaClO + H2O2 = NaCl + O2 + H2O

其次,鲁米诺与氢氧化物反应时生成了一个双负离子(Dianion),它可被过氧化氢分解出的氧气氧化,产物为一个有机过氧化物。

该过氧化物很不稳定,立即分解出氮气(鲁米诺被有机氧化剂如二甲基亚砜氧化后不是生成氮气,而是生成含氮有机物),生成激发态的3-氨基邻苯二甲酸。激发态至基态转化中,释放的能量以光子的形式存在,波长位于可见光的蓝光部分。

鲁米诺(Luminol),俗称发光氨。刑侦用的鲁米诺试剂是由鲁米诺和双氧水混合而成,血液中含有铁元素,铁会加速鲁米诺与双氧水的氧化进程,但在氧化反应时,其释放的部分能量会以光子形态存在,能在黑暗中持续发出30秒的荧光。

化学名称为3-氨基-苯二甲酰肼。常温下是一种苍**粉末,是一种比较稳定的人工合成的有机化合物。化学式为C8H7N3O2。 对于在犯罪现场肉眼无法观察到的血液,鲁米诺试剂可以显现出极微量的血迹形态(潜血反应),同时鲁米诺是一种较强的弱酸,对眼睛、皮肤、呼吸道有一定刺激作用。

由于血红蛋白含有铁,而铁能催化过氧化氢的分解,让过氧化氢变成水和单氧,单氧再氧化鲁米诺让它发光。所以鲁米诺广泛应用于刑事侦查、生物工程、化学示踪等领域。 法医学上,鲁米诺反应可以鉴别经过擦洗,时间很久以前的血痕。生物学上则使用鲁米诺来检测细胞中的铜、铁及氰化物的存在。

化学发光法和酶联免疫法的区别?

荧光胶体和乳胶三者区别

巴德尔之血

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提问

摘要荧光法,又叫化学发光法,主要是依据化学检测体系中待测物浓度与体系的化学发光强度在一定条件下呈线性定量关系的原理,利用仪器对体系化学发光强度的检测,而确定待测物含量的一种痕量分析方法。这种方法可以测出抗原和抗体,相当于酶联四代。

胶体金法是利用胶体金免疫层析的方式,较为灵敏、特异性。主要用于血清或血浆中HIV特异性抗体的诊断。T与C色带均为红色时表示血液中有HIV抗体,T不显色而C显色表明血液中不含HIV抗体。较多用于献血现场的筛选以及人们的自检。

乳胶法是在胶体金法上面进行的一些改进,让检测更加快速。原理是将特异性的抗体先固定在纤维膜的一个区带,当待检测的液体浸入后,会沿着膜向前移动,相遇之后样品的抗原与抗体特异性结合。这个方式快速简便。

这两种方式并不完全一样,但是均为对HIV抗体的检测方式。本身乳胶法是基于胶体金法的。胶体金法是可以以胶体金为显色标记物。胶体法主要是用于尿液以及唾液的检测。试纸中也分为唾液型试纸和血液型试纸。血液型试纸会更佳准确。

胶体金和乳胶法相当于酶联三代(只测抗体,不测抗原)。

试述化学发光免疫分析的基本原理及其类型,其与荧光的根本区别是什么

1、原理上的区别

化学发光法依据化学检测体系中待测物浓度与体系的化学发光强度在一定条件下呈线性定量关系的原理,利用仪器对体系化学发光强度的检测,而确定待测物含量。

酶联免疫法原理是在测定时把受检标本和酶标抗原或抗体与固相载体表面的抗原或抗体起反应加入酶反应的底物后,底物被酶催化变为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据颜色反应的深浅来进行定性或定量分析。

2、分类上的区别

化学发光法依据供能反应的特点,可将化学发光分析法分为普通化学发光分析法,供能反应为一般化学反应;生物化学发光分析法,供能反应为生物化学反应;电致化学发光分析法,供能反应为电化学反应。根据测定方法又可分为直接测定CL分析法、偶合反应CL分析法等。

酶联免疫法根据测定方法可分为双抗体夹心法;双位点一步法;间接法测抗体法,利用酶标记的抗体以检测已与固相结合的受检抗体;竞争法,以测定抗原为例,受检抗原和酶标抗原竞争与固相抗体结合,因此结合于固相的酶标抗原量与受检抗原的量呈反比。

3、作用上的区别

化学发光法在痕量金属离子、各类无机化合物、有机化合物分析及生物领域都有广泛的应用。

酶联免疫法可用于测定抗原,也可用于测定抗体,ELISA现在已成为目前分析化学领域中的前沿课题 。

百度百科-化学发光法

百度百科-酶联免疫法

(1)化学发光免疫分析是以发光物质作为标记物,在反应体系中发光物质在碱性介质中氧化时释放大量自由能,产生激发态的中间体,该激发态的中间体由最低振动能级回到稳定的基态、各个振动能级时产生辐射,同时产生能量,多余的能量即为发射光子,从而产生发光现象。利用发光信号的测量仪器,分析接收的光量子产额,通过计算机系统转换成被测物质的浓度单位。

(2)化学发光免疫分析的类型:

①根据所采用的标记物的不同可分为发光物标记、酶标记、元素标记化学发光免疫分析;②根据所采用的发光反应的体系不同和标记物的不同分为:化学发光免疫分析、化学发光酶免疫分析、微粒子化学发光免疫分析、电化学发光免疫分析。

(3)化学发光反应系统中以化学反应为基础,化学发光的首要条件是吸收了化学能而处于激发态的分子或原子必须能释放出光子或者能将能量转移到另一个物质的分子上并使这种分子激发,当这种分子回到基态时释放出光子。化学发光与荧光的根本区别是形成激发态分子的激发能原理不同。荧光是发光物质吸收了激发光后使分子产生发射光,化学发光是化学反应过程中所产生的化学能使分子激发产生的发射光。因此,化学发光反应中反应过程必须产生足够的激发能是产生发光效应的重要条件。

化学发光法是检测什么的?_化学发光法原理