不知道大家听没听说过这样一种仪器，它的名字叫做分光光度计。它是用来测量各种比色系统中的绝对的河差分的测量值的。主要有0°/45°和积分球式两种类型的。你知道它是测量什么的吗？它竟然是用来测某个波长下的一种吸光度或者透光度的，然后根据标准曲线，从而得出该物质的浓度的一种工具。看完是不是觉得很高端呢？下面我们要教大家的是如何使用分光光度计这种高端的仪器。
1.使用仪器前，使用者应该首先了解本仪器的结构和工作原理。以及各个操作旋钮之功能。在未接通电源前，应该对仪器的安全性进行检查，电源线接线应牢固。通地要良好，各个调节旋钮的起始位置应该正确，然后再接通电源开关。仪器在使用前先检查一下，放大器暗盒的矽胶干燥筒(在仪器的左侧)，如受潮变色，应更换干燥的蓝色矽胶或者倒出原矽胶，
烘干后再用。2.将灵敏度旋钮调置“1”档(放大倍率最小)。
3.开启电源，指示灯亮，选择开关置于“T”，波长调至测试用波长。仪器预热20分钟。
4.打开试样室盖(光门自动关闭)，调节“0”旋钮，使数字显示为“00.0”，盖上试样室盖，将比色皿架置与蒸馏水校正位置，使光电管受光，调节透过率“100％”旋钮，使数字显示为“100.0”。
5.如果显示不到“100.0”，则可适当增加微电流放大器的倍率档数，但尽可能置低倍率档使用，这样仪器将有更高的稳定性。但改变倍率后必须按(4)重新校正“0”和“100％”。
6.预热后，按(4)连续几次调整“0”和“100％”，仪器即可进行测定工作。
7.吸光度A的测量按(4)调整仪器的“00.0”和“100％”，将选择开关置于“A”，调节吸光度调零旋钮，使得数字显示为“.000”，然后将被测样品移入光路，显示值即为被测样品的吸光度值。
8.浓度C的测量：选择开关由“A”旋置“C”，将已标定浓度的样品放入光路，调节浓度旋钮，使得数字显示为标定值，将被测样品放入光路，即可读出被测样品的浓度值。
9.如果大幅度改变测试波长时，在调整“0”和“100％”后稍等片刻，(因光能量变化急剧，光电管受光后回应缓慢，
需一段光回应平衡时间)，当稳定后，重新调整“0”和“100％”即可工作。最后，我们要跟大家强调的一点是关于吸收池，也就是比色杯的使用注意事项。主要有四点：首先是在使用比色杯之前，一定要彻底清洗干净，做到杯壁不挂水珠的程度。其次是一定不可以用手指触摸透光面。
第三点是切不可加热烘烤杯子。最后一点也是最重要的一点是，一定要固定使用参比杯和样品杯，并且标明日期。好了，今天的内容就讲到这里，希望这些内容对大家有所说明。物质对光的吸收是具有选择性的，各种不同的物质都具有其各自的吸收光谱，因此当某单色光通过溶液时，其能量就会被吸收而减弱，光能量减弱的程度和物质的浓度有一定的比例关系，也即符合于比色原理---比耳定律。
本仪器是可见光分光光度计，其波长范围为360
nm～800
nm，具有测量被测溶液透光率（T）值，吸光度(A），浓度直读，模拟信号输出等功能。分光光度技术主要是利用物质特有的吸收光谱来鉴定物质性质及含量的技术，其理论依据是Lambert和Beer定律。
使用方法：
（1）仪器预热。打开样品室盖（光门自动关闭）。开启电源，指示灯亮，仪器预热20
min。选择开关置于“T”旋钮，使数字显示为“00.0”。
（2）旋动波长手轮，把所需波长对准刻度线。
（3）将装有溶液的比色皿放置比色架中，令参比溶液置于光路。
（4）盖上样品室盖，调节透光率“100％T”旋钮，使数字显示为“100.0T”。（如显示不到100％T，则可加按一次。
（5）吸光度A的测量：仪器调T为0和100％后，将选择开关转换至A调零旋钮，数字显示应为“.000”。然后拉出拉杆，使被测溶液置入光路，数字显示值即为试样的吸光度A。
（6）测定完毕后，先打开样品室盖，再断电源。比色杯应清洗干净后，再贮放保存。
（7）浓度直读
按MODE键，使CONC批示灯亮，交已标定浓度的溶液
移入光路，按下溶液调节键（↑100％T键的↓0％键），使数字显示为标定值，将被测溶液移入光路，即读出相应浓度值。
（8）仪器数字显示背后，装有接线柱，按下FUNC键，可输出模拟信号
分光光度计是一种精密的测量仪器，使用时需要注意以下几点事项：防止光电管疲劳、正确拿取比色皿、比色皿的液体容量、对照调零、更换溶液时的盖子、保持比色皿清洁。
1、防止光电管疲劳：在不测定时，应将试样室盖打开，使光路切断，以延长光电管的使用寿命。
2、正确拿取比色皿：手指只能捏住比色皿的毛玻璃面，而不能碰比色皿的光学表面。
3、比色皿的液体容量：液体最好不要超过容积的2/3，以避免液体溢出。
4、对照调零：在使用分光光度计时，一定要进行对照调零，以确保测量结果的准确性。
5、更换溶液时的盖子：在更换待测溶液时，分光光度计的盖子要及时盖上，保持内部环境黑暗。
6、保持比色皿清洁：比色皿在使用后，应立即用水冲洗干净，必要时可用1:1的盐酸浸泡，然后用水冲洗干净。
分光光度计作用
1、核酸的定量：通过测量核酸在特定波长下的吸光度，可以定量分析核酸的含量。
2、蛋白质的直接定量（UV法）：通过测量蛋白质在特定波长下的吸光度，可以直接定量蛋白质的含量。
3、比色法蛋白质定量：通过比色法测量蛋白质溶液在特定波长下的吸光度，从而定量蛋白质的含量。
4、细菌细胞密度（OD600）：通过测量细菌细胞悬浮液在特定波长下的吸光度，可以估算细菌细胞密度。
5、分光光度计还可以应用于红外光谱分析、原子吸收光度计等不同领域。红外分光光度计可以用于测量物质的吸收光谱，从而进行物质鉴定、分析化学结构等。
一、操作要领
1、先进行“使用前的检查”，一切正常后打开比色池暗箱盖，接通电源，预热20分钟。
2、调节波长选择旋钮λ至所需波长，灵敏度调节钮放在“1”位置。调节“0”电位器，校正电表指针指0。
3、将装有参比溶液及待测溶液的比色皿按顺序放入比色架中，使参比溶液处于光路位置，轻轻盖上比色皿暗箱盖，使光电管受光，调节“100%”电位器至电表指针至满刻度（T100%或A=0）处。
4、如果放大器灵敏度不合适（即步骤3中不能调满刻度），可重新调整灵敏度调节旋钮（放大器灵敏度有3档，是逐渐放大的，“1”最低，其选择原则是保证能使空白时调满刻度，尽可能采用灵敏度较低档，，这样仪器将有更高的稳定性），如果灵敏度不够，可逐渐升高，但改变灵敏度后，必须按步骤3重新校正“0”和“100%”。
5、按步骤3连续调整“0”和“100%”，直至稳定，至此调校完毕，即可进行测定工作。
6、轻轻拉动比色皿架拉杆，使待测液置于字光路位置，即可读取表头指针所指的读数（T%或A值）。
7、测量完毕，打开比色皿暗箱盖。
8、实验结束，关闭电源，将比色皿取出洗净，用软纸擦净比色皿架及暗箱盖，盖上暗箱，散热后，罩好仪器罩。
二、注意事项
1、使用721型分光光度计时，连续光照光电管的时间不可太长，以免光电管疲劳。不测定时，必须打开暗箱盖，切断光路，以光电管的使用寿命。
2、根据需要选择使用不同厚度的比色皿，同一厚度的一套比色皿应检查使用。方法是使一套比色皿盛装同一种有色溶液，测其透光率相对值，该值最大相差不应超过0.5%。
3、拿取比色皿时，只能用手捏毛玻璃片，且不可用手捏透光面，以免污损而影响透光性能。比色皿外壁的水珠应用镜头纸或柔软的吸水纸轻轻揩擦，不可用用硬纸或用力擦拭。
4、比色皿装溶液时，以装满2/3为宜，不可过满或太浅，以防拉动比色皿架时溅出或影响测定。对系列溶液的测量，应从稀到稠顺序依次进行，以减少误差。
5、比色皿应用盐酸-乙醇（1:2）混合液或1:1HNO3溶液浸泡，再用自来水，蒸馏水洗涤，不可用碱液、氧化性强的洗涤液（如铬酸洗液），以防腐蚀或造成粘结缝开裂。也不能用毛刷洗，以免损坏其透光面，更不能在炉子、火焰上或烘箱内加热干燥。
6、在分析工作中，根据有色溶液的浓度的大小选用适合规格的比色皿，以使溶液吸光度控制在0.2-0.8范围内，一面减少测量误差。
三、721分光光度计简介
721分光光度计是利用物质的光的吸收特征对不同物质进行定性或定量分析的仪器。
1、用途
广泛适用于冶金、化工、机械、医学、生物、农业、环保、教学等行业和领域。该仪器也是食品厂、饮用水厂办QS认证中的必备检验设备。
2、主要技术指标
波长范围：360∽800nm
波长精度：360∽600±3nm600∽700±6nm700∽800±8nm
透射比正确度：±2.5%
透射比重复性：0.5
1、把分光光度计电源线连接好，最好使仪器的电源具备接地功能；
2、接通电源后，按动开机开关，然后让仪器预热至少20分钟，仪器会自动校正，然后显示546.0nm 0.000A说明自检结束，就可以开始测试；
3、使用“方式”键测试的方式，再根据自己要测量的结果选透光率、吸光度、和浓度的测试；
4、要对波长进行分析，选择按键6，然后按提示依次进行；
5、把样品溶液和要测定的溶液各自倒入比色皿中后，然后打开样品盖，把盛着溶液的比色皿插入另一个比色皿中，最后盖好样品盖；
6、把参比的溶液拉到光路中按住“OABS/100%T”键，这时的显示器会显示出BLANKING,，直到最后显示出“100%T”或者是“0.000A”为止；
7、最后仪器显示出“100%T”或者是“0.000A”即可结束测试。这时被测样品的透光度、吸光度等参数就可直接读出；
8、分光光度计使用完毕，关上电源，取出比色皿洗净，样品室用软布或软纸擦净。
分光光度计使用步骤如下：
材料准备：一个分光光度计、些许纯溶剂、一个样本、些许空白试样、一个比色皿等。
1、将分光光度计放置在水平台面上，插好电源并打开设备。
2、使用空白试样校准分光光度计。
3、确定要测量的波长范围。
4、将要测量的样品加载至比色皿中，确保比色皿干净且无杂质。
5、将比色皿插入分光光度计中央，关闭比色皿盖子，并记录读数即可。
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